接头DNA（adaptor DNA）是一段人工合成的短DNA片段，含有特定酶切位点，能够与钝性末端或粘性末端匹配。该类片段可用于连接钝性末端DNA与粘性末端DNA，通过酶切位点产生与目标粘性末端匹配的末端结构，其已知序列设计可为未知DNA片段提供引物结合位点。文库构建即为测序片段添加接头，DNA片段需要加接头修饰才能进行上机测序。
在临床应用中，当接头DNA与DNA比例为100:1时，DNA文库浓度达到最高值。优化后的接头连接方法在医学实验室领域有所应用。 常规的DNA文库构建包含片段化DNA、末端修饰、添加接头等步骤，使用T4 DNA连接酶将Adaptor与修饰后的DNA片段相连接，然后通过琼脂糖凝胶电泳或者磁珠纯化的方法筛选出连接好的适配子。DNA建库步骤还包括末端修复/加A尾和加接头，可使用T4 DNA连接酶进行加接头操作。
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